Dénes Orsolya

A 2023-24-es tanév szakmai gyakorlatát hallgató társammal, Geréd Boglárkával együtt végeztem, július 1 és augusztus 30 között. Az ERASMUS+ mobilitási program lehetőségeit kihasználva a Debreceni Egyetem Általános Orvostudományi Karának Immunológia Intézetében szereztünk tapasztalatot. Eddigi tanulmányaink során csak baktérium sejtekkel dolgoztunk és szerettünk volna megismerni, kipróbálni, hogy milyen lehet humán sejtekkel kísérletezni, így esett a választásunk erre az intézetre.

Számunkra nehézséget a lakás keresés jelentett. Kollégiumba szerettünk volna megszállni, de egyik sem tudott számunkra két hónapig szállást biztosítani, mivel júliusban került megszervezésére az Európai Egyetemi Játékok sportesemény, amelyre több száz külföldi sportoló érkezett, így a kollégium helyek számukra voltak fenntartva.   Rengeteg keresgélés és visszautasítás után találtunk egy albérletet 15 percnyire az immunológia intézettől. Vasárnap reggel érkeztünk meg a városba, elfoglaltuk a szobánkat, berendezkedtünk, majd elindultunk felfedezni a környéket.

Hétfőn reggel kezdődött a szakmai gyakorlat, első lépésben megismerkedtünk a labor dolgozóival és a laborban használt műszerekkel. Mivel még másodévesként nem tanultunk immunológiát, a laborvezető tartott egy gyorstalpalót a tárgyról, illetve ismertette kutatásuk célját. A projektjük célja a ferroptózis négy útvonalának jellemzése és megértése. A laboratóriumi kutató csoport rákkal kapcsolatban olyan módszereket vizsgál, amelyek növelik a sejthalál intenzitását és fokozzák az immunreakciókat. A ferroptózis a sejthalál egy új formája, amely a sejtekben a vas felhalmozódásából és lipidperoxidációjából ered.

Általában akkor következik be, amikor a sejtek antioxidáns rendszerei kimerülnek, az oxidatív stressz szintje megnő és a GSH-függő lipidperoxid-javító rendszerek károsodnak.

Gyakorlatunk során a WM-35 sejtvonallal dolgoztunk, amely egy olyan humán melanóma sejtvonal, amit a bőr melanocitáiból származó rákos sejtekből izoláltak. Ezen a sejtvonalon próbáltunk ferroptózist indukálni, különböző koncentrációban használva a CUMENE, Fino-2, ML-162 valamint a Sulfasalazyne vegyületeket.

A WM-35 sejteket egy sejttenyésztő flaskában kaptuk, első lépésben ezeket a letapadt sejteket kellett felszedni.

Másnap a sejtekről lecseréltük a médiumot, majd megfelelő koncentrációban hozzáadtuk a ferroptózist indukáló vegyületeket. Ismét 24 órás inkubáció következett. 24 óra lejárta után az ölt sejteket felszedtük a plateről és felvettük őket propidium jodidba (PI). A PI egy standard reagens, amelyet a sejtek életképességének értékelésére és a nem életképes sejtek kizárására használnak az áramlási citometriában. A PI nem jut be az élő sejtekbe, mert azok plazmamembránnal rendelkeznek. Ha egy sejt membránja megsérül, a PI bejut a sejtbe, és megköti a DNS-t, piros fluoreszcenciát bocsátva ki.

A sejtek életképességét áramlási citométerrel mértük. Az áramlási citometria során a szuszpenzióban levő sejteket úgynevezett köpenyfolyadékba (közegbe) helyezik, majd egyenként átvezetik őket egy lézerfénnyel megvilágított mérési ponton. 

A szakmaigyakorlatunk során számos biotechnológiai és molekuláris biológiai technikát mutattak be nekünk, például hogy hogyan történik az egér csontvelőjének izolálása, az RNS izolálása. Láthattuk, hogy hogyan raknak össze migrációt, hogy hogyan festik meg a sejteket. Valamint segítettünk MDA sejteket passzálni, monocitát, neutrofillt szeparálni, ELISA tesztet összerakni, egér aortát izolálni, Jurkat-3 és HT-29 sejteket lefagyasztani. 

Próbáltuk minden szabadidőnket kihasználni, szerettük volna minél jobban megismerni a várost. Hétvégente megnéztük Debrecen látványosságait: a Déri Múzeumot, a Református Kollégium Múzeumát, Szabó Magda emlékházát, MODEM Modern és Kortárs Művészeti központot, a Református Kistemplomot, a Nagyerdei Víztornyot; lehetőségunk volt borozni a naplementében a Református Nagytemplom két tornya közti panorámajárdán.

Esténként sokat sétáltunk az Egyetem téren valamint a Nagyerdei parkban.

Részt vettünk a július végén megszervezésre kerülő Campus Fesztiválon, ahol számos ismert fellépő koncertjén bulizhattunk, mint például Margaret Island, Dzsúdló, Moriones, Azariah és még sok más. Lehetőségünk volt élőben is jelen lenni a sokak által ismert augusztus 20 alkalmából megrendezésre kerülő Debreceni Virágkarneválon. A karneváli héten ugyancsak koncerteken vettünk részt: Irie Maffia, Magna Cum Laude és a Bagossy Brothers Company, ami tökéletes zárása volt a  nyárnak. (9, 10. kép)

Összességében a gyakorlat jól felépített, szervezett volt és így átfogó betekintést nyújtott a modern molekuláris biológia kutatások világába, a rákkutatás területén is. Mindkettőnk nevében állíthatom, hogy nagyon jól éreztük magunkat az Immunológia Intézetben. A laborban az összes dolgozó nagyon kedves, türelmes és segítőkész volt. Mivel fiatalos volt a társaság, mindig jó volt a hangulat, ezért minden nap örömmel mentünk dolgozni. Köszönjük szépen hogy itt tölthettük el szakmai gyakorlatunkat! Külön köszönet Dr. Koncz Gábornak, valamint  két Phd hallgatónak: Jenei Viktóriának és Muszka Zsuzsának a sok magyarázatért, tanításért.

Azt javasolnám azoknak, akik gondolkoznak az Erasmus+ mobilitás program adta lehetőségeken, hogy ne féljenek kipróbálni, hiszen rengeteg tapasztalatot és felejthetetlen élményeket szerezhetnek.